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核酸提取磁珠在病毒DNA提取中的7个应用指标

作者: 发布时间:2021-09-19 浏览次数:1134
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GNT系列核酸提取磁珠是洛阳吉恩特生物科技有限公司自主研发生产的纳米磁性生物微球,具有悬浮时间长、磁响应速度快、核酸吸附效率高等特点,目前已广泛应用于各类样本的DNA、RNA提取,对于血清、拭子等核酸含量较低的样本,GNT-1系列磁珠具有较高的灵敏度,且通用性良好,可与各类主流试剂和主流仪器匹配,提取结果可直接用于下游检测。


■材料与方法

试剂:GNT-S04 病毒DNA/RNA提取试剂

磁珠:GNT系列 核酸提取磁珠

核酸提取仪:GNT32

荧光定量PCR仪:宏石 SLAN-96P


1、线性关系

分别对105IU/ml、104IU/ml、103IU/ml、102IU/ml的HBV进行提取,线性关系良好。

编号   标本浓度   标本用量   Ct值

1      105 IU/ml    50ul        27.87

2                                         27.95

3     104 IU/ml     50ul        31.32

4                                        31.22

5     103 IU/ml     50ul       34.16

6                                       34.34

7     102 IU/ml     50ul      36.83

8                                      37.02

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2、磁珠灵敏度

分别对103 IU/ml、102 IU/ml的HBV进行提取,结果显示,当标本投入量为50ul  103IU/ml的HBV时,检测效率仍能保持稳定。

编号  标本浓度  标本用量  Ct值

1      103 IU/ml   50ul      34.41

2                                     34.49

3                                     34.52

4                                     34.31

5      102 IU/ml  50ul      37.22

6                                     36.85

7                                     37.16

8                                     38.67

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3、批次稳定性

选取8个不同批次的核酸提取磁珠,对HBV 进行提取,考虑到人工操作环节以及核酸提取仪本身的稳定性,认为不同批次的磁珠,提取结果一致,稳定性较好。

编号  磁珠批号    标本浓度与用量      Ct值

1     20201208  103 IU/ml、50ul    35.26

2     20210114                                35.33

3     20210208                                35.30

4     20210329                                35.51

5     20210416                                35.09

6     20210507                                34.92

7     20210609                                35.00

8     20210720                                35.17

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4、磁珠冻融测试

对磁珠进行-20℃的反复冻融测试,结果显示,磁珠冻融后,提取效率差异不明显,但出于对实验结果稳定性的考虑,尽量不要对磁珠进行冻融,或尽可能减少冻融次数。

编号  冻融次数  标本浓度与用量       Ct值

1 未冻融    103 IU/ml、50ul     35.55

2                                                    35.68

3      冻融一次                                35.62

4                                                   35.96

5      冻融二次                               35.89

6                                                   36.18

7      冻融三次                               36.16

8                                                   36.01

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5、磁珠用量测试

对同一HBV 标本进行不同磁珠使用量的测试,结果显示,10ul磁珠用量即可满足实验要求,磁珠用量过多,反而可能会降低提取效率,建议使用适量的磁珠进行核酸提取。

编号  磁珠用量    标本浓度与用量       Ct值

1        10ul        103 IU/ml、50ul    35.07

2                                                    35.04

3        15ul                                     35.07

4                                                    35.36

5        20ul                                     35.22

6                                                    35.36

7        25ul                                     35.53

8                                                    35.45

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6、磁珠效期测试

对保存24个月的磁珠进行HBV提取,测试磁珠的有效期,结果显示,磁珠室温(洛阳地区全年室温在2-33℃左右)存放24个月后,提取效率保持一致。

编号  磁珠批号   标本浓度与用量     Ct值

1     20210826  103 IU/ml50ul     34.50

2                                                  34.33

3                                                  34.50

4                                                  34.53

5    20190807                              35.02

6                                                  34.89

7                                                  34.73

8                                                  35.10

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7、磁珠储存条件测试

将磁珠分别保存于GNT 保存液中、无水乙醇中、异丙醇中、胍盐溶液中,并进行磁珠储存条件的测试。结果显示,磁珠在保存液中、无水乙醇中、异丙醇中均可以较稳定的储存,保存于胍盐溶液中的磁珠,对提取效率有较明显的影响,建议在对磁珠进行封装保存时,选择合适的试剂。

编号  储存条件     标本浓度与用量   Ct值

1    GNT保存液   103 IU/ml、50ul      35.41

2                                                        35.52

3      无水乙醇                                    35.46

4                                                        35.65

5      异丙醇                                        35.73

6                                                        35.42

7     胍盐溶液                                      36.18

8                                                        36.62

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作为核酸提取磁珠的生产厂家,吉恩特生物会持续对产品进行检验,欢迎朋友们提出宝贵建议,我们会进行测试并反馈。

■订购信息

http://www.giant-bio.com/home-productinfo-id-8.html


吉恩特生物,坚持用数据说话!


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